طرق إنتاج المزارع النقية

توجد الأحياء الدقيقة Microorganisms نادراً في الطبيعة كنوع مفرد single species. بدلاً من ذلك، تختلط مع أنواع أخرى، في مزرعة مختلطة mixed culture تسمّى غالباً بالغشاء الحيوي biofilm. لذلك، لدراسة نوع, يجب أن يستخدم علماء الاحياء الدقيقة microbiologists وتقنيوا المختبرات laboratory technologists مزرعة نقية pure culture — أي عشيرة تتكون من نوع واحد فقط. هذا مهم بشكل خاص عند محاولة تعريف ممرض pathogen، كما إكتشف باستير Pasteur عندما حاول تعريف العامل المسئول عن الكوليرا cholera.

إذا كان لديك مزرعة مرق مختلطة mixed broth culture من الأنواع البكتيرية، كيف يمكن عزل الكائنات الحية كمستعمرات نقية pure colonies؟ تتوفر طريقتين مؤسّستين.

1- طريقة الأطباق المصبوبة pour-plate method

الأولى هي طريقة الأطباق المصبوبة. هنا, توضع كمية صغيرة من المزرعة المختلطة في طبق مزرعة معقّم sterile culture dish. ثم تصبّ بيئة الآغار المذابة في الطبق ويسمح بالتصلّب. خلال حضانة من 24 إلى 48 ساعة، تنقسم الخلايا لتشكل مستعمرات منفصلة في كافة أنحاء الآغار.

2- طريقة تخطيط الأطباق streak-plate method

الثانيه, تقنية أكثر إستخداماً، تسمّى طريقة تخطيط الأطباق، تستخدم طبق وحيد من الآغار المغذي nutrient agar. يزال لقاح inoculum من المزرعة المختلطة بحلقة أو إبرة معقّمة sterile loop or needle باستخدام تقنية التعقيم aseptic technique، وتعمل سلسلة من الخطوط على سطح منطقة واحدة من الطبق (تقنية العقيم: ممارسة نقل الأحياء الدقيقة إلى وسط مزرعة معقم بدون إدخال كائنات أخرى ملوثة). تلهب الحلقة على النار، تلمس المنطقة الأولى، وتعمل سلسلة ثانية في المنطقة الثانية. بنفس الطريقة، تعمل الخطوط في المناطق الثالثة والرابعة، وبالتالي تنتشر الخلايا الفردية لكي تنمو كمستعمرات منفصلة. عند الحضانة، ستنمو كلّ خلية تصاعدياً exponentially لتشكل مستعمرة منفصلة على الطبق.

في كلتا الطريقتين، يمكن أن يختار الباحث researcher، التقني technologist، أو الطالب student عينات من المستعمرات لمزيد من التجارب والزراعة الثانوية sub-culturing (الزراعة الثانوية: عملية نقل البكتيريا من أنبوب أو طبق إلى أنبوب أو طبق آخر).